血培養(yǎng)（bloodculture），是種將新鮮離體的血液標(biāo)本接種于營養(yǎng)培養(yǎng)基上，在定溫度、濕度等條件下，使對(duì)營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌生長繁殖并對(duì)其進(jìn)行鑒別，從而確定病原菌的種人工培養(yǎng)法。選用血培養(yǎng)作為診斷試驗(yàn)的最重要目的是，要確診患者細(xì)菌血癥或真
血培養(yǎng)（blood culture），是種將新鮮離體的血液標(biāo)本接種于營養(yǎng)培養(yǎng)基上，在定溫度、濕度等條件下，使對(duì)營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌生長繁殖并對(duì)其進(jìn)行鑒別，從而確定病原菌的種人工培養(yǎng)法。
選用血培養(yǎng)作為診斷試驗(yàn)的最重要目的是，要確診患者細(xì)菌血癥或真菌血癥，以及后續(xù)的病原菌鑒定和測(cè)抗菌藥物的敏感譜。
血培養(yǎng)指征
可疑細(xì)菌感染患者出現(xiàn)以下任一指征時(shí)，應(yīng)采集血培養(yǎng)：
1.體溫＞38℃或＜36℃
2.寒戰(zhàn)
3.外周血 WBC 增多（>10.0×109/L，核左移時(shí)）或減少（<4.0×109/L)
4.呼吸頻率＞20次／ min ，或動(dòng)脈血PaCO2<32mmHg
5.心率＞90次／ min
6.血壓降低7．皮膚粘膜出血
8.昏迷
9.多器官功能障礙
10.炎癥指標(biāo)如 CRP 、降鈣素原（ PCT )、1,3-3-D葡聚糖（ G 試驗(yàn)）升高等
采集時(shí)機(jī)
要求
- 對(duì)懷疑菌血癥患者，在考慮使用抗菌藥物之前（藥物醫(yī)囑執(zhí)行前），應(yīng)立即開立化驗(yàn)單、采集血培養(yǎng)標(biāo)本
- 對(duì)于剛?cè)朐旱奈Ｖ馗腥净颊撸催M(jìn)行抗菌藥物治療之前，即使體溫不高，也應(yīng)及時(shí)采集血培養(yǎng)
- 除特殊情況之外，采取血培養(yǎng)后2-5天內(nèi)，無需重復(fù)采取血培養(yǎng)
說明
- 寒戰(zhàn)或發(fā)熱初起時(shí)采集。盡可能在寒和發(fā)熱初起30分鐘﹣1小時(shí)內(nèi)采集血標(biāo)本，此時(shí)血流中病原菌濃度最高
- 不同時(shí)間點(diǎn)多次采血，只有在疑似連續(xù)性菌血癥時(shí)才有必要，如感染性心內(nèi)膜炎或其他血管內(nèi)感染（如導(dǎo)管相關(guān)感染）
血培養(yǎng)標(biāo)本采集消毒程序
- 皮膚消毒：嚴(yán)格執(zhí)行三步法（防止皮膚定植菌、過路菌污染）
1．用75％酒精擦拭靜脈穿刺部位待干30秒以上。
2．然后用1%-2％碘酊作用30秒或10％碘伏作用60秒，從穿刺點(diǎn)向外畫圈消毒，至消毒區(qū)域直徑達(dá)3cm以上。
3．最后用75％酒精脫碘，待酒精揮發(fā)干燥后采血。
- 新生兒及對(duì)碘過敏的患者，只能用75％酒精消毒60s，待穿刺部位酒精揮發(fā)干燥后穿刺采血
1．用75％酒精消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞，作用60秒自然干燥后，然后注入。
2．不能用含碘消毒液。
血培養(yǎng)標(biāo)本采集注意事項(xiàng)
要求
- 嚴(yán)格無菌操作，不允許在皮膚消毒后用手按壓靜脈，除非帶有無菌手套
- 不推薦采血和接種血培養(yǎng)瓶更換注射器針頭，采用真空采血裝置能降低污染率
說明
- 無論采用何種采血方法，血培養(yǎng)可接受的污染率通常是≤3%
- 研究表明，經(jīng)過專門培訓(xùn)的熟練抽血者采集血培養(yǎng)的污染率為3%，而未經(jīng)培訓(xùn)的住院醫(yī)生和護(hù)士污染率則達(dá)11%
- 對(duì)護(hù)士就血培養(yǎng)標(biāo)本采集進(jìn)行專門、嚴(yán)格的培訓(xùn)是非常必要的
采集部位
- 從兩側(cè)上肢靜脈（肘靜脈）采血
- 疑似左側(cè)感染性心內(nèi)膜炎，采集肘動(dòng)脈或股動(dòng)脈更好
- 不建議常規(guī)采集動(dòng)脈血，其診斷價(jià)值不比靜脈血更大
- 嚴(yán)禁從靜脈三通處肝素帽取下后采集血培養(yǎng)標(biāo)本
- 常規(guī)血培養(yǎng)不宜從血管留置導(dǎo)管或血管留置裝置中采集，除非懷疑或需要排除導(dǎo)管相關(guān)血流感染
血管內(nèi)導(dǎo)管標(biāo)本
1.經(jīng)導(dǎo)管采血培養(yǎng)
- 留置導(dǎo)管采血培養(yǎng)只是在評(píng)估導(dǎo)管感染時(shí)需要．應(yīng)由導(dǎo)管近端嚴(yán)格消毒后經(jīng)穿刺抽取血液
- 同時(shí)須抽另一側(cè)外周靜脈血進(jìn)行另外一套血培養(yǎng)
2.導(dǎo)管末端培養(yǎng)（拔除導(dǎo)管）
- 75％乙醇消毒導(dǎo)管周圍皮膚，拔出整條導(dǎo)管后用無菌剪刀取下體內(nèi)段末端約5cm長度，置于無菌容器中送檢
- 如不能作床旁接種，可將導(dǎo)管置含有少量生理鹽水的無菌試管內(nèi)送檢
- 不應(yīng)將剪下的導(dǎo)管體內(nèi)段置肉湯增菌液增菌，導(dǎo)致假陽性
導(dǎo)管標(biāo)本的實(shí)驗(yàn)室處理
- 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)將體內(nèi)段導(dǎo)管立即置血平上作滾動(dòng)涂布接種，置35℃培養(yǎng)8~24h，觀察有無細(xì)菌生長
- 如細(xì)菌菌落數(shù)≥15 CFU / Tip 即為陽性，則認(rèn)為血流感染是可能與導(dǎo)管有關(guān)
- 但滾動(dòng)涂布接種多只能檢測(cè)導(dǎo)管外壁粘附定植細(xì)菌
- 繼發(fā)性導(dǎo)管相關(guān)感染，常見于原發(fā)感染灶釋放入血或透過腸粘膜屏障入血，細(xì)菌在導(dǎo)管腔內(nèi)壁粘附生長更常見，滾動(dòng)涂布接種可能陰性。須在無菌生理鹽水超聲震蕩后取震蕩液培養(yǎng)
采集套數(shù)
- 同時(shí)或間隔短時(shí)間內(nèi)采集2套，即"雙瓶雙側(cè)”（每套包括1只普通血培養(yǎng)瓶及1只厭氧血培養(yǎng)瓶）
- 必要時(shí)從下肢靜脈采血做第三套血培養(yǎng)
- 研究表明，血培養(yǎng)2套和3套的檢出率顯著高于只做1套的檢出率
- 至少“雙側(cè)兩瓶”，即從一個(gè)部位采血接種一個(gè)需瓶，再從另一部位采血接種另一個(gè)厭氧瓶
- 一次靜脈采血注入到多個(gè)培養(yǎng)瓶中應(yīng)視為單個(gè)血培養(yǎng)
- 兒童厭氧菌感染機(jī)會(huì)不高，通常只需采集需氧瓶
采血量及標(biāo)本運(yùn)送
采血量
- 自動(dòng)化血培養(yǎng)儀要求成人8-10ml／瓶，兒童1-5mI／瓶
- 成人血培養(yǎng)采血量在2~30m之間，病原菌檢出率與采血量成正比例
- 每增加1ml的血液，病原菌的檢出率大約增加3.2%,假陽性也有可能隨之提高
- 兒童患者因?yàn)檠褐胁≡鷿舛容^高，采血量不需與成人等同
- 血液病患者或者血容量相對(duì)較低患者，建議使用兒童瓶來減少血液的采集量、增加病原菌的檢出率
- 當(dāng)采血量少于推薦值時(shí)，必須首先滿足需氧瓶，將剩余血接種入?yún)捬跗?/li>
采集后立即送微生物實(shí)驗(yàn)室放入培養(yǎng)箱，最好1h內(nèi)
否則，應(yīng)20-25C室溫保存，原則上也不應(yīng)超過12小時(shí)，切勿冷藏
血培養(yǎng)的報(bào)告周期
- 95%-97％的有臨床價(jià)值的細(xì)菌會(huì)在3-4天內(nèi)被自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)檢出，目前仍推薦5天的培養(yǎng)周期
- 其實(shí)絕大多數(shù)細(xì)菌在24小時(shí)內(nèi)陽性報(bào)警，真菌相對(duì)延緩一天，3-5天出最終報(bào)告
- 自動(dòng)化血培養(yǎng)儀的標(biāo)準(zhǔn)血培養(yǎng)周期為5天特殊情況可適當(dāng)延長培養(yǎng)時(shí)間
- 如臨床懷疑布魯菌感染，可延長培養(yǎng)至28天等
建議
1．當(dāng)血培養(yǎng)至24 h 后仍為陰性，不考慮革蘭陰性菌感染，針對(duì) G ＋進(jìn)行選擇用藥；
2．當(dāng)血培養(yǎng)至48 h 后仍為陰性而臨床感染癥狀明顯，高度懷疑為念珠菌性血流感染；
3．當(dāng)血培養(yǎng)72 h 后仍為陰性，而患者臨床表現(xiàn)良好，可停止應(yīng)用抗菌藥物。
