液相色譜儀操作及原理(高效液相色譜儀的泵壓力上不去是什么原因)

可能的原因：

1.purge閥沒(méi)有擰緊；

2.泵體充滿氣體，可以擰緊出口閥開(kāi)大流速直至有液體就出再擰緊即可；

3.某個(gè)管路接口沒(méi)有擰緊或者某條管路斷了導(dǎo)致漏液。

開(kāi)電源，開(kāi)機(jī)，設(shè)置參數(shù)方法，準(zhǔn)備工作完成，開(kāi)始平衡，分析，輸出結(jié)果，打印。

液相色譜儀是指利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異，對(duì)混合物進(jìn)行先分離，而后分析鑒定的儀器。 基本用途: 液相色譜儀對(duì)高沸點(diǎn)、難氣化合物的混合物通過(guò)色譜柱核淋洗劑并以實(shí)現(xiàn)分離。 使用范圍: 應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境化學(xué)、石油化工等部門(mén)。 系統(tǒng)由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng)，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相，被流動(dòng)相載入色譜柱（固定相）內(nèi)。 由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù)，在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)，經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過(guò)程，各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別，被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出，通過(guò)檢測(cè)器時(shí)，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀，數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來(lái)高效液相色譜儀主要有進(jìn)樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。

高效液相色譜儀的圖譜算不上指紋圖譜，只是組份分離后的光譜吸收?qǐng)D，色譜分析方法主要是歸一法，內(nèi)標(biāo)法，外標(biāo)外等廣州大學(xué)來(lái)定性定量的，比如在相同條件（流動(dòng)相，色譜柱條件不變）下，分析已知含量的標(biāo)準(zhǔn)樣品，得到相應(yīng)的保留時(shí)間和面積，然后將相應(yīng)的未知含量組份進(jìn)樣分析，得到圖譜后，對(duì)比保留時(shí)間和面積，通過(guò)比較保留時(shí)間識(shí)別組份名稱(chēng)（定性），按比例計(jì)算出組份含量（定量）；

1．將已經(jīng)過(guò)濾并脫氣的流動(dòng)相注入儲(chǔ)液罐；

2. 用流動(dòng)相沖洗金屬過(guò)濾器，然后將過(guò)濾器浸入儲(chǔ)液罐的流動(dòng)相中；

3. 將儲(chǔ)液罐放置在一定的高度，以避免由于搬運(yùn)和其他操作人員的移動(dòng)而造成不必要的跌落。

4. 然后按以下順序依次啟動(dòng)高效液相色譜儀：泵→檢測(cè)器→高效液相色譜軟件→按預(yù)先計(jì)劃的方法設(shè)置軟件參數(shù)，如分析時(shí)間、檢測(cè)波長(zhǎng)、流速等。

5. 啟動(dòng)泵，運(yùn)行5分鐘，主要是為了排除系統(tǒng)中的氣泡，結(jié)束后關(guān)閉所有排氣閥；

6. 然后按照預(yù)先計(jì)劃的速度，以固定的速率，如1mL/min左右，運(yùn)行流動(dòng)相，走基線，直到基線平穩(wěn)，就可以在計(jì)算機(jī)軟件上進(jìn)行監(jiān)視；

7. 基線平穩(wěn)后，在軟件中設(shè)置樣品的運(yùn)行參數(shù)，如流速和分析時(shí)間等。分析時(shí)間會(huì)因樣品、流速、柱長(zhǎng)等因素變化。

8. 參數(shù)設(shè)置完畢后，將固定體積的樣品溶液注入進(jìn)樣閥，然后在軟件中啟動(dòng)注入命令，進(jìn)樣器中的樣品溶液就隨流動(dòng)相進(jìn)入色譜柱；

9. 通過(guò)軟件監(jiān)視各項(xiàng)讀數(shù)，當(dāng)檢測(cè)器檢測(cè)到樣品所有峰值，停止運(yùn)行并設(shè)置新的進(jìn)樣。在下一個(gè)樣品分析前，建議留出5-10分鐘，待流動(dòng)相通過(guò)色譜柱，以便清洗之前樣品的殘留物；確認(rèn)基線穩(wěn)定后，進(jìn)行下一次注射。

10. 分析結(jié)束后，先關(guān)閉檢測(cè)器，然后關(guān)閉泵，最后關(guān)閉軟件。